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胰岛素elisa试剂盒的实验条件选择是非常重要的
  • 发布日期:2018-09-05      浏览次数:292
    •   胰岛素elisa试剂盒定量测定结果可根据标准曲线计算样品中待测物的含量,以样品孔的OD值大于阴性对照OD值 2~3SD,作为阳性结果的阈值。胰岛素elisa试剂盒请贮存于2-8℃,切勿冷冻,避免阳光直晒。未使用完的酶标板条应密封,2-8℃保存,具有方便、快速、灵敏等特点,因其性质稳定、使用方便、价格低廉、在科研领域用途比较广泛,胰岛素elisa试剂盒有效期为12个月,生产日期见批号,实验显色深,含量少,显色浅,含量多,本试剂盒灵敏度0.1ppb。
        胰岛素elisa试剂盒优势:
        1.5ml即可样品需求量小;
        2.样品量100?l时可达5pg/ml; 样品量5?l时可达100pg/ml灵敏度高;
        3.0.1 - 6.4 ng/ml 或1 - 64 ng/ml)测量范围广:同一试剂盒可完成不同含量的胰岛素的检测;
        4.批间差异小:批间差异低于10%,实验结果更可靠;
        5.血清,血浆及体液均可适用性广;
        6.溶血影响小:测试结果显示溶血20mg/ml对实验结果几乎没有影响。
        在胰岛素elisa试剂盒进口中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
        (1)固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
        (2)包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18~24小时。蛋白质包被的适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值zui大而蛋白量最少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
        (3)酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
        (4)酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是双氧水在临用前加入。
        胰岛素elisa试剂盒主要用于测定血清、血浆、组织和相关液体样本中的含量或者活性,刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响,您可放心使用。
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